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口腔扁平苔藓患者血清IL-18水平及意义的研究
作者:admin 日期:2012年02月08日 来源:互联网 浏览:

核心提示:目的 探讨口腔扁平苔藓(oral lichen planus ,OLP)患者血清中IL-18的水平及其临床意义。

  摘要:目的 探讨口腔扁平苔藓(oral lichen planus ,OLP)患者血清中IL-18的水平及其临床意义。方法 采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定30例OLP患者和30例健康志愿者的血清中IL-18水平。结果 OLP组血清中IL-18表达水平为4.45±2.83pg/ml,正常对照组血清中IL-18表达水平为2.01±0.42pg/ml,OLP组血清IL-18水平均较正常对照组明显增高(P<0.05)。结论 IL-18在OLP的发生发展过程中起重要作用;OLP患者的血清检测是诊断OLP的敏感手段。
  关键词:口腔扁平苔藓,白介素-18,血清检测,酶联免疫吸附法
  口腔扁平苔藓(oral lichen planus ,OLP)是临床上常见的口腔粘膜感染性疾病,病因错综复杂且尚未完全明确,但固有层T淋巴细胞浸润的现象提示细胞介导的免疫反应与该病的发病机制密切相关[1]。白介素-18(interleukin-18,IL-18)γ干扰素诱导因子(IGIF),是一种前炎症细胞因子。近年来研究发现, IL-18 在慢性炎症性疾病的发生发展过程中起着不可或缺的作用[2]。本实验旨在观察不同类型OLP患者血清中IL-18 表达水平的改变, 并对其临床意义进行了探讨。
  1. 材料与方法
  1.1 研究对象
  本研究试验组纳入2006年1月~2006年6月就诊于四川大学华西口腔医院粘膜科经临床和病理学检查确诊的OLP患者30例,其中男性14例,女性16例,年龄45±17岁;按病损类型分为网纹/斑块型和充血/糜烂型,其中网纹/斑块型14例,充血/糜烂型16例;2例伴皮肤病损;所有患者近3月内均未用过糖皮质激素和免疫调节剂治疗。对照组30例健康者,其中男性14例,女性16例,年龄43±18岁。各组均排除肿瘤、心血管疾病、自身免疫性、过敏性及其他感染性疾病。
  1.2 研究方法
  1.2.1 主要试剂及仪器
  美国R&D公司IL-18 ELISA试剂盒;美国Bio-Red公司Benchmark酶标仪。
  1.2.2 血清标本收集
  晨空腹常规静脉采血5ml,1000g/min离心5分钟,分离血清,﹣20℃分装冻存待测。
  1.2.3 标本检测
  采用ELISA法测定血清中的IL-18水平。操作步骤和测定值换算严格按说明书进行(复孔取均值)。具体操作步骤:将血清样品及系列浓度标准品100μl,37℃,120min,洗板;加一抗50μl,37℃,60min,洗板;加酶标抗体100μl,37℃,60min,洗板;加底物(TMB)100μl,避光37℃,10min;加入10μlH2SO4终止反应;5min内在492nm比色,读取OD值。结果判定采用标准曲线法。
  1.3 统计学方法
  各组数据以 X ±S表示,用SPSS13.0统计软件进行处理,两组间均数比较采用t检验。显着性水平α=0.05。
  2. 结果
  总体及各型OLP患者血清中IL-18表达水平均明显高于对照组(p<0.05),两种类型OLP患者血清中IL-18表达水平无明显差别(p>0.05)。
  3. 讨论
  OLP是一种慢性、非特异性炎症,其显着病理变化为固有层大量的淋巴细胞呈带状浸润。研究证实,多种细胞及细胞因子(主要是Th1细胞、Th2细胞及其分泌的细胞因子)构成的网络失调是导致OLP发病的重要机制[3]。
  IL-18主要由单核细胞-巨噬细胞产生,是强有力的IFN-γ诱生剂,使原始的CD4+T细胞向Th1分化,并激活淋巴细胞和巨噬细胞,直接促进TNF-α、IL-8、巨噬细胞炎症蛋白-1α和单核相比趋化因子-1等细胞因子的表达。研究表明,IL-18在一系列免疫性疾病中发挥重要的免疫调节作用, 如在特异性皮炎、Ⅰ型糖尿病、过敏性哮喘、银屑病[4、5]患者血清中都可观察到IL-18水平的上调。此外,Fujimori等[6]检测了37例急性移植物抗宿主病(acutegraft-versus-host disease,aGVHD)患者血清IL-18水平,发现IL-18升高的水平与aGVHD的严重程度密切相关,IL-18可能成为诊断aGVHD敏感性、特异性指标;而慢性移植物抗宿主病(chronic graft-versus-host disease,cGVHD)的发生可能与IL-18的水平降低有关。由于OLP与GVHD在病理表现上有相似性[7],由此可以推测IL-18在OLP的发病过程中可能起着同样的重要作用。而目前有关OLP患者体内IL-18表达情况的研究国内外尚未见报道。本试验初步研究发现OLP组血清中IL-18值均明显高于对照组,表明活化的巨噬细胞和单核细胞可分泌较多的IL-18,从而促进了OLP慢性炎症化的发生和发展。对不同类型OLP患者的血清IL-18水平对比研究发现各组之间IL-18水平未见明显差异。大量的研究证明IL-18是一种辅助性T细胞1型(Th1)细胞因子,能诱导Th1细胞、抑制IL-4和IL-10的产生;而近来研究发现,IL-18在自身免疫性疾病中,同样具有促进Th2型免疫反应作用。在适当的条件下,可以抑制由IL-12诱导的Th1型细胞分化,并通过激活NK细胞、T淋巴细胞产生IL-4,从而促进Th2前体细胞分化[8、9]。OLP中同样存在Th1主导反应与Th2主导反应。在OLP发生过程中,淋巴渗出中Th1 类细胞因子会导致基底层细胞损伤与破坏。为使免疫反应达到平衡,一方面,局部Th2细胞因子分泌增加,活性增强以对抗Th1类细胞因子的作用;另一方面,机体也可通过TGF2β抑制两类细胞因子的产生而减轻损伤。但是由于OLP患者病变部位抗原性一直存在,Th1 和Th2类细胞因子所介导的炎性反应持续性存在,最终导致慢性可见性的OLP损伤[10]。因此,IL-18复杂的免疫调节功能可能在不同类型的OLP发生、发展、慢性迁延的整个过程中都扮演着重要的作用;而IL-18相关的细胞因子疗法可能在OLP的治疗中扮演重要角色。
  然而,作为一个初步的探索性研究,本试验样本量较小,初步证实了IL-18在OLP患者血清、中表达增高,但OLP患者血清中IL-18的水平与OLP发病时间、病损面积以及病损部位的关系,本研究尚未涉及,需要进一步研究证实。
  参考文献
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  [9] Allen J E and Maizels RM. Th1/ Th2 : reliable paradigm or dangerous dogma? [J] Immunol Today,1997 ,18(8) :387-392
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